（接上文）题目：
Network pharmacology and experimental analysis reveal Ethyl caffeate delays osimertinib resistance in lung cancer by suppression of MET
研究思路梳理：
本研究采用系统药理学预测 + 实验验证策略，系统分析肺痈宁方活性成分、作用靶点及其在奥希替尼耐药肺癌中的作用机制，并通过分子对接、细胞与动物实验多维度验证。
主要结果：
1. 活性成分与共同靶点筛选
从TCMSP数据库共筛选出146个活性成分，对应904个潜在靶点。从GeneCards数据库获取131个奥希替尼耐药相关靶点，韦恩图分析得到22个共同靶点。
展开剩余74%2. PPI网络与关键通路分析
构建22个共同靶点的蛋白质互作网络，识别出EGFR、STAT3、ERBB2、HSP90AA1、MET等11个核心靶点。KEGG富集分析显示这些靶点显著富集于PI3K/AKT信号通路，其中ERBB2、EGFR、MET、HSP90AA1、MCL1、IGF1R等6个基因与该通路密切相关。
3. 实验验证核心靶点
RT-qPCR与免疫组化结果显示，肺痈宁方可显著下调MET、ERBB2、HSP90AA1的表达，提示其通过调控这些靶点延缓耐药。
4. 分子对接锁定活性成分
分子对接结果显示，咖啡酸乙酯与MET的结合能最低（-6.3 kcal/mol），提示其为肺痈宁方中调控MET的关键活性成分。
5. 体外实验验证咖啡酸乙酯功能
CCK-8、Edu、侵袭实验表明，咖啡酸乙酯可显著抑制奥希替尼耐药细胞（PC9OR、HCC827OR）的增殖、迁移并诱导凋亡。Western blot证实咖啡酸乙酯可下调MET及PI3K/AKT通路磷酸化水平。
点评：
本研究首次通过“系统药理学 + 实验验证”体系，系统阐明肺痈宁方延缓奥希替尼耐药的作用机制，锁定咖啡酸乙酯–MET–PI3K/AKT轴为关键调控通路，不仅为中药复方辅助靶向治疗提供了理论依据，也为抗肿瘤药物耐药研究提供了新的思路与方法。
未来研究可进一步结合单细胞测序、空间转录组及临床样本验证，深入探讨肺痈宁方在肿瘤微环境、免疫调节及肠道菌群等方面的系统调控机制，推动其在肺癌精准治疗中的应用。
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